化學(xué)品溞類(lèi)急性活動(dòng)抑制試驗 

1范圍

本標準規定了化學(xué)品類(lèi)急性活動(dòng)抑制試驗的原理、儀器和設備、試驗準備、試驗程序、質(zhì)量保證與質(zhì)量控制、數據與報告。

本標準適用于測試與評價(jià)可能暴露于水生生態(tài)環(huán)境的化學(xué)品對類(lèi)急性活動(dòng)的抑制作用。

2術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標準。

半數效應濃度（E00）median effective concentration 引起50％的受試活動(dòng)抑制的受試物濃度。

活動(dòng)抑制immobilisation

輕晃試驗容器，15 s內體不能游動(dòng)，視為活動(dòng)受到抑制。

3受試物信息

a) 結構式；

b) 純度；

c) 水中溶解度；

d)蒸氣壓；

e)在水中和光中的化學(xué)穩定性

f) 正辛醇一水的分配系數；

在水溶液中的可靠的定量分析方法、回收率以及檢測限；

快速生物降解性試驗結果。

4 原理

幼溞（試驗開(kāi)始時(shí)齡小于24 h）以一定的濃度范圍暴露于受試物溶液中48 h，相對于空白對照組，觀(guān)察記錄24 h和48 h受試物對類(lèi)活動(dòng)抑制情況。通過(guò)對結果分析計算48 h的EC50亦可選 24 h的EC50結果。

5參比物

推薦使用****（K2Cr207），其24 hEC50值范圍為0· 6 mg/L-2.1 mg/L，參見(jiàn)參考文獻[ 1 ]、

6儀器和設備

6 · 1接觸到試驗溶液的試驗容器和其他設備**是全玻璃制品或由其他化學(xué)惰性材料制成。試驗容器通常為試管或燒杯，每次使用前必須按照標準的實(shí)驗室程序清洗干凈；試驗容器應便于加蓋，以減少水分蒸發(fā)造成的損失，并避免灰塵進(jìn)人溶液。揮發(fā)性物質(zhì)應在足夠大的完全密閉的容器中進(jìn)行，以免溶解氧受限或過(guò)低。

6. 2需用下列部分或全部?jì)x器設備：

一一溶解氧儀（帶有微電極或其他能夠測定少量樣品的溶解氧濃度的適當裝置）； pH計；

一一一適當的溫度控制設備；總有機碳（TOC）測定儀；化學(xué)需氧量（COD）測定儀；一一測定水硬度的設備等。

7試驗準備

7· 1受試生物

**大型溞，也可用其他溞類(lèi)。

7· 2試驗液

a)選擇的試驗液濃度一般稀釋而成。貯備液將受加人到試驗用水中配制而成。應盡量避免使用助、乳化齊口 有時(shí)需用這些物質(zhì)來(lái)配制適當濃度的貯備液。有關(guān)助溶劑、乳化齊口 劑的準則見(jiàn)參考【4】。任何情況下，受試物的濃度不能超過(guò)其在試驗用水中的溶解度。

b) 通常不能調節試驗液的pH值。如果溶液的pH不在6、9范圍內，調節貯備液的pH值進(jìn)行第二套試驗。調節pH值可以使用HCI或NaOH，但必須保證貯備液的性質(zhì)、濃度不發(fā)生改變，即不發(fā)生化學(xué)反應或沉淀作用。

8質(zhì)量保證與質(zhì)量控制

對照組（包括空白對照組和溶劑對照 抑制率不能超過(guò)10％；其受抑制情況包括：活動(dòng)受抑制、有疾病癥狀或受損傷，例如變色、行為異常（如飄浮于液面）等。

試驗結束時(shí)對照組和試驗組的溶解氧濃度應不小于3 mg/L。

9數據與報告

9· 1數據

以表格形式列出24 h和48 h對照組和各試驗組試驗溢數、活動(dòng)受抑制數及百分率。以24 h 和48 h抑制百分率與受試物濃度作劑量-效應曲線(xiàn)，選擇合適的統計方法（如概率單位法）計算 24 h EC50（可選）和48 h EC50及其95％的置信區間。

當獲得的數據使用標準的方法無(wú)法統計時(shí)，無(wú)抑制作用的*高濃度和引起100％抑制的*低濃度可用于推導EC50（可以認為其為兩者濃度的幾何平均值）。

9· 2試驗報告

試驗報告應包括以下內容：

9 · 2· 1受試物

a)物理屬性和相關(guān)理化性質(zhì)；

b)化學(xué)標識鑒別數據，包括純度。

9 · 2· 2受試生物

類(lèi)的來(lái)源和種類(lèi)，提供者（若已知），培養條件（包括食物的種類(lèi)、來(lái)源、喂食量以及喂食頻率）。

9 · 2· 3試驗條件

試驗容器：試驗容器的類(lèi)型與體積，試驗液的體積，每個(gè)容器中溞類(lèi)的數量，每個(gè)濃度的平行數；

儲備液和試驗液制備的方法，包括助溶劑、分散劑和乳化劑的使用及其濃度；

試驗用水：來(lái)源和水質(zhì)特征。若使用重組水，應提供其組成和制備方法；

培養條件：溫度、光照強度、光照周期、溶解氧、PH值等；

9 · 2·4 結果

各觀(guān)察時(shí)間點(diǎn)內，對照組和試驗組中溞類(lèi)活動(dòng)受抑制或行為異常的數量和百分數；

參比物的實(shí)驗結果；

每個(gè)容器中受試物的配置濃度和分析測定受試物濃度的結果，分析方法的回收率和檢測限；

試驗期間水質(zhì)測定結果，包括溫度、PH值、溶解氧等；

24 h EC50（可選）和48 h EC50及其95％的置信區間，以及劑量-效應曲線(xiàn)及其標準誤差。用于計算EC50的統計程序；

若出現偏離，需說(shuō)明偏離及其對試驗結果的影響。