關(guān)鍵詞：N糖基化位點(diǎn),N糖基化,N-糖基化位點(diǎn)分析,N-糖基化位點(diǎn)鑒定,蛋白質(zhì)組學(xué),代謝組學(xué),tmt,抗體測序,itraq,蛋白質(zhì)譜鑒定,蛋白質(zhì)組學(xué),代謝組學(xué),tmt,抗體測序,itraq,蛋白質(zhì)譜鑒定,蛋白質(zhì)組學(xué),代謝組學(xué),tmt,抗體測序,itraq,蛋白質(zhì)譜鑒定"

目前，糖基化氨基酸位點(diǎn)鑒定主要利用生物質(zhì)譜技術(shù)結合蛋白酶以及專(zhuān)一性糖苷內切酶的作用。一般先對糖基化位點(diǎn)進(jìn)行特異的質(zhì)量標記，使之與未修飾的蛋白質(zhì)質(zhì)量之間有一個(gè)特定的差異，通過(guò)質(zhì)譜分析檢測差異，進(jìn)而通過(guò)串聯(lián)質(zhì)譜鑒定是在哪個(gè)氨基酸殘基上發(fā)生了糖基化。

N-聚糖蛋白的鑒定Z_U_I常用的方法是N-糖苷酶F（PNGase F）酶解法。N-糖苷酶F作為脫氨基酶，可以將原先糖基化的天冬酰胺脫氨基后轉變?yōu)樘於彼幔斐上鄬Ψ肿淤|(zhì)量增加1，再通過(guò)質(zhì)譜比較含有天冬氨酸的肽與含有非糖基化天冬酰胺的肽的相對分子質(zhì)量，即可獲得發(fā)生N-糖基化的氨基酸位點(diǎn)。N糖基化位點(diǎn)鑒定的步驟主要包括N-糖苷酶F酶消化、聚糖分離釋放、LC分離糖肽和質(zhì)譜分析。

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